(1)用厌氧盒进行通风培养。有些厌氧箱可以同时进行微生物操作,如接种箱,直接培养,操作简便,成功率高,缺点是大多数实验室不具备,损耗大,对于小规模的培养试验,费用较高。
(2)使用厌氧罐、厌氧盒或厌氧培养袋+厌氧气袋,可在小或中空间制作厌氧环境,操作方便,无需任何复杂的专用设备,可在所有实验室使用,非常适合实验室中小型试验操作。
注:培养基必须与厌氧环境气体循环,如试管、锥形瓶等容器,以确保塞的透气性;培养平板容器时,必须确保平板容器具有良好的透气性,不能用密封膜密封缠绕。
(3)液体培养基可采用覆盖石蜡隔离氧气的方法,如泡肉培养基、梭菌增菌培养基等。培养基配制分装后,在培养基上方覆盖约0.5-1cm厚的液体石蜡,然后进行灭菌,无需使用厌氧培养箱或厌氧罐即可直接培养厌氧菌。
注:消毒前将石蜡覆盖,在灭菌过程中,培养基中溶解的氧气逸出,冷却后石蜡将阻碍空气中氧气的进入,可以较好地制造厌氧环境;培养基中还可补充一定量的还原性铁粉或硫乙醇酸钠、半胱氨酸等还原性成分,帮助维持厌氧环境。
(4)有些培养基不需要厌氧培养就能自然形成厌氧环境,如硫乙醇酸盐流体培养基。静置过程会自发分层,下层为无氧环境,无需任何厌氧设备或液体石蜡即可培养厌氧菌。