(1)培养基的制备
覆有石蜡的液体培养基,在灭菌之前,应将液体石蜡包裹起来;流体培养基或半固体培养基在有氧条件下培养厌氧菌时,可用沸水浴或其它除氧方法将溶解的氧气排出。
(2)操作过程
由于氧气对厌氧菌有毒,整个操作过程应在专用无氧设备中进行。如果在正常空气中操作,从厌氧菌暴露在空气中到厌氧环境培养结束,整个过程应尽可能快,一般不超过15分钟,暴露时间越长,厌氧菌越容易死亡。
(3)培养环境
厌氧环境可以通过厌氧罐、厌氧培养箱、厌氧气包等方式提供。除了保证气体环境无氧外,一些厌氧菌通常需要5%-10%的二氧化碳、氢等气体来促进生长,提高厌氧菌对氧气的耐受性,更容易成功培养。